Diabetologia：激活但功能受损的记忆Tregs在1型糖尿病患者进展缓慢的过程中日益扩展

从第一次经常出现肾脏自身抗形体到经常出现1同型癌症临床副作用的实质性率在幼儿时期就有很好的阐述，多个肾脏自身抗形体中性的幼儿中所有70%在胰岛素转换后10年内肺结核癌症，而随访15年的幼儿这一人口比例降低到84%。即便如此，占去临床1同型癌症一半以上的同型1同型癌症的得病系统会还没有受益更进一步的数据分析。

越来越多的人开始应以用于分期系统会来并不一定1同型癌症的实质性：个形体在经常出现多种肾脏自身抗形体时转至第1前期，经常出现血糖所致时转至第2前期，经常出现副作用时转至第3前期。一些多发肾脏自身抗形体中性的个形体，在1期和2期，实质性较极快，并工业发展为得病的1同型癌症。我们之后阐述了一小组在首次样品到多种肾脏自身抗形体抽取后大概10年无癌症的却是极快实质性者，这小组病患人数极少，但形态非常具体。随后，我们发现肾脏自身蛋白质特异性CD8+T巨噬细胞重排在实质性缓极快的病患中所必需不存在，但在更进一步得病和长期存在的癌症病患中所很容易样品到。这似乎表明，与实质性病患比起，这些病患自身免疫重排的调节增强。

20世纪数据分析表明，尽管调节性T巨噬细胞(Treg)使用量正常，但癌症病患存在一些机制原因，其中所除此以外对IL-2的重排能力也降低。此外，癌症病患中所的现象CD4+T巨噬细胞似乎对调节更具抵抗性，显出为现象T巨噬细胞的诱导增强，自然造成了的Treg和形胃造成了的诱导Treg，以及蛋白质经历的CD4+T巨噬细胞中所IL-2重排增强。本数据分析的目的是阐述了CD4+调节性T巨噬细胞(Treg)在一小群却是缓极快实质性者中所的形态，他们的平均年龄为43岁(31-72岁)，随访小时为18-32年。

方法有：BOX数据分析是一项以人群为基础的横向数据分析，在21岁以下确诊的病患亲属中所检查1同型癌症的危险因素所。我们之后阐述了长期缓极快实质性者的形态，他们持续保持多重肾脏自身抗形体中性大约10年，但没有经常出现癌症的临床副作用，极快性或非透过性自身免疫。随后，10名继续持续保持无癌症并愿意提供大量体液抽取的缓极快实质性者纳入T和B巨噬细胞机制分析。在目前的数据分析中所，8名极快实质性者(SP小组)，中所位年龄43岁(31-72岁)，18 - 32岁两者之间的肾脏自身抗形体中性。所有的自发性都属于1同型癌症实质性的1期，尽管一些人随后失掉了肾脏自身抗形体对某些蛋白质的中性重排，然而，一名病患之后属于2期大概6年，但没有经常出现临床副作用，一名病患被临床为癌症，该受试者72岁，在采集物理抽取时，其HbA1c升高到53 mmol/mol(7%)，在数据分析中所对该供形体透过了实际上评量。裂解外周血单个核巨噬细胞(PBMCs)，采用多给定流式巨噬细胞心法和T巨噬细胞诱导试验评量供形体中所Treg的增益、特异性和机制。应以用于FlowSOM和CITRUS(聚类鉴定、举例来说和回归)透过无委派聚类分析，评量Treg特异性。

结果：与肥胖供形体比起，来自极快实质性形体的潜意识CD4+T巨噬细胞的委派聚类辨识，激已逝的潜意识CD4+ Treg增益降低，与抑制作用诱导的TNFR相关蛋白(GITR)传达降低有关。一名HbA1c升高的病患与实质性缓极快者和匹配的对照小组比起，Treg五音有所不同。机制分析表明，与肥胖供形体比起，来自缓极快实质性形体的Treg介导的CD4+现象T巨噬细胞诱导明显受损。显出为对现象CD4+T巨噬细胞CD25和CD134传达的诱导降低。

布1 全面性的特异性分析辨识，CD4+Treg亚同型在极快实质性函数调用中所降低。由FlowSOM分解成的Treg一楼，小组织起来在来自所有供形体的已逝CD4+CD45RA -巨噬细胞上。根据标识物传达鉴定出10个元簇:潜意识T巨噬细胞_1;潜意识T cell_2;潜意识T cell_3;潜意识T cell_4;CD49b潜意识T巨噬细胞;HLA-DR + GITR +潜意识T巨噬细胞;文件系统会Treg_1;文件系统会Treg_2;文件系统会Treg_3;和文件系统会Treg_4。(a)应以用于9个不同Treg标识分解成的10个元簇的MST。每个端口都是一个战略性(100个战略性)，却是大的元战略性(10个元战略性)在端口小组周围上色。每个端口中所的饼布回应以单个标识的传达分级。(b)每个元聚类的热布，以辨识整形体标识传达。(c, d)为HD小组(c)和SP小组(d)分解成布，以及FlowSOM辨别的每个元簇的覆盖物。(e-l)相较轻元素为每个metacluster筒线或布(轻元素> 0.05%)明确为HD和SP小组:文件系统会Treg_2 (e),文件系统会Treg_3 (f),文件系统会Treg_4 (g), HLA-DR + GITR +潜意识T巨噬细胞(h)、潜意识T cell_1(i),潜意识T cell_2 (j),潜意识T cell_3 (k) n d CD49b潜意识T巨噬细胞(l)。紫色左上方都是慈善机构SP 606。**p< 0.01, Wilcoxon分组符号秩检验。此键适用于布形部分(a)， (c)， (d)和d (e-l)

布2 应以用于CITRUS的预测模同型推测，Treg增益的降低是实质性缓极快的布案。分级除此以外(a - f)和柑橘分析(g-k)比较SP自发性和匹配的HD自发性在CD4+CD45RA−T巨噬细胞上的差异。(a)基因同型CD25+ cd127 lotreg和CD25loCD127+T c e l群形体的都是性布。CD25+ cd127lotreg被CD39和FOXP3可溶性，然后通过HLA-DR和GITR传达透过裂解，模拟FlowSOM群形体。(b) HD(黑点)和SP(虎纹)小组以及供形体SP 606(紫色)中所CD25+ cd127的增益汇总布。(c-f) CD25+CD127loCD39+FOXP3+和CD25loCD127+除此以外同构的筒线或布;(c) HLA-DRloGITR−(文件系统会Treg_2)， (d) HLA-DRintGITRlo(文件系统会Treg_3)， (e) HLA- d RhiGITR+(文件系统会Treg_4)， (f) HLA- d RhiGITR+(HLA-DR+GITR+文件系统会T cell)。(g - i)甜菜簇旋转由(g) CD127， (h) CD25和(i) FOXP3传达低压后处理，箭头值得注意的簇被辨别为SP和HD函数调用两者之间的不同。(j)筒线或布辨识了在SP(虎纹)和HD(灰点)小组中所，CITRUS潜意识Treg_3和Treg_4的相较轻元素(人口比例)。(k)直方布辨识每个簇的特异性(粉红色)和Treg标识相较传达与背景传达(深蓝色);上列，文件系统会Treg_3;下面一路上，文件系统会Treg_4。背景与所有其他簇中所标识的传达有关。*p< 0.05， **p< 0.01, Wilcoxon分组符号秩检验

布3 与肥胖献血者比起，实质性缓极快者潜意识treg的GITR降低。每个潜意识CD4+T巨噬细胞元簇(潜意识T巨噬细胞_1;潜意识T cell_2;潜意识T cell_3;CD49b +潜意识T巨噬细胞;HLA-DR + GITR +潜意识T巨噬细胞;文件系统会Treg_2;文件系统会Treg_3;来自FlowSOM的memory Treg_4)样品每个传达标识的变异。(a,b)来自HD (a)和S (b)函数调用的传达热布(sp606不除此以外在内)。(c,d)潜意识Treg_4元簇中所所有HD(白色)、所有SP(深蓝色)和SP 606(紫色)的FlowSOM GITR传达串联，辨识直方布(c)和汇总布(d)。Wilcoxon分组符号秩和检验，p< 0.07(紫色)所有供形体除此以外，p< 0.05(深蓝色)供形体SP 606和匹配的HD不除此以外在测试中所。(e,f) HLA-DRhiGITR+Tregs中所GITR传达，从分级除此以外，从所有HD(白色)、所有SP(深蓝色)和SP 606(紫色)串联，辨识直方布(e)和汇总布(f) *p< 0.05, Wilcoxon分组符号秩检验

布4 来自缓极快实质性的CD4+ treg巨噬细胞控制现象CD4+T巨噬细胞的能力也降低。SP小组用深蓝色的线或和左上方回应以，HD小组用白色的线或和左上方回应以，紫色的线或/左上方回应以供形体sp606。应以用于CD4+CD25+ Treg分选试剂盒对CD4+T巨噬细胞透过分选。CD4+CD25−(此番者)被标识为CFSE, Treg按判读的人口比例滴定。用抗CD3 /28微珠已逝化巨噬细胞，培植3天后透过流式巨噬细胞心法样品。(a-d)与CD4+此番者相较应以的treg培植(自形体)(e-h) HD、SP或SP 606 Treg与HD此番者培植。(a,b,f) CFSE增殖(a,e)和CFSE诱导%-(b,f)。(c, d,h) CD25 (c,g)和CD134 (d,h)的诱导%-。应以用于中性对照(激已逝的响应以巨噬细胞不含treg)计算诱导%-。*p< 0.05， **p< 0.01， ***p< 0.001，重复测量双向方差分析。†p < 0.0 5 Bonferroni的事后多重比较测试

布5 现象CD4+T巨噬细胞对缓极快实质性的T巨噬细胞已逝化的诱导更脆弱。SP小组用深蓝色的线或和左上方回应以，HD小组用白色的线或和左上方回应以，紫色的线或/左上方回应以供形体sp606。应以用于CD4+CD25+Treg分选试剂盒对CD4+T巨噬细胞透过分选。CD4+CD25−(此番者)被cfsel标识，treg按判读的人口比例滴定。用抗CD3 /28微珠已逝化巨噬细胞，培植3天后透过流式巨噬细胞心法(CD25反染)和巨噬蛋白酶分析。HD Treg与HD、SP或sp606此番者共同培植。(a,b) CFSE增殖(a)和CFSE诱导%-(b)。(c,d) CD25诱导%-(c)和CD134诱导%-(d)。(e,f) IFN-γ(e)和IL-17A (f)在浙大中所的传达。***p< 0.001， **p< 0.01，重复测量双向方差分析。†p < 0.0 5 Bonferroni的事后多重比较测试

论据：我们结论的论据是，来自缓极快实质性子的已逝化潜意识CD4+Treg在GITR传达中所受益了扩展和丰富，强调了进一步数据分析Treg在1同型癌症安全性个形体中所的异质性的必要性。

原文出处：

Boldison J, Long AE, Aitken RJ,et al.Activated but functionally impaired memory Tregs are expanded in slow progressors to type 1 diabetes.Diabetologia 2021 Oct 28